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八聯(lián)管離心機是一種利用離心力分離液體和固體顆粒,或液體和液體混合物中的每種成分的機器。八聯(lián)管離心機主要用于將懸浮液中的固體顆粒從液體中分離出來(lái),或將兩種密度不同且互不相容的乳液中的液體分離。那么八聯(lián)管離心機常見(jiàn)的離心方式有哪些呢?
1、差速離心法:許多具有生物活性的生物大分子和亞細胞器不穩定,需要低溫高速離心。常用的方法是差速離心。離心后,棄去上清,分離沉淀,將分離出的上清以增加的速度離心以分離沉淀的第二部分。這樣,速度不斷提高,需要的物質(zhì)一步步分離出來(lái)。使用這種方法可以有效地分離出尺寸差異較大的顆粒,但無(wú)法分離出相同尺寸的顆粒,而且單個(gè)成分往往不均勻,與其他類(lèi)型的顆?;旌?。
2、區域離心法:其中可分為速度區離心和等密度速度區離心兩種。
(1)速度區域離心法:對于少量懸浮液,會(huì )產(chǎn)生一個(gè)小密度梯度,該梯度用于穩定顆粒沉降。由于離心作用,顆粒從初始區域被去除。運動(dòng)速度取決于顆粒的大小和形狀,以及它們所承受的實(shí)驗室八聯(lián)管離心機的離心力。離心一定時(shí)間后,各種薄片會(huì )根據它們的相對速度移動(dòng)和分離,形成一系列區域。通過(guò)這種方式,我們可以將沉降速度的差異降低到 20% 或更多的顆粒。
(2)等壓區域離心法:將待分離顆粒的懸浮液置于密度梯度溶液中或實(shí)際將顆粒溶解在梯度溶液中。離心后,這些顆粒要么漂浮,要么下降,達到與自身密度相同的液體。他們在這里沒(méi)有重量。無(wú)論它們離心多久,它們都不會(huì )移動(dòng)。這些粒子可以變成一系列區域,每個(gè)區域都在自己的密度區域中。因此,它是一種利用浮動(dòng)密度粒度來(lái)分離粒度的技術(shù)。使用的介質(zhì)通常是氯化銫 (Cscl) 和硫酸銫 (Cs2SO4)。前者適用于DNA提取,后者適用于RNA提取。與速度區離心法相比,這種方法的一個(gè)主要缺點(diǎn)是,在離心過(guò)程中,顆粒不可避免地暴露在具有高濃度梯度的溶液中,這會(huì )對顆粒造成局部損傷,并可能對顆粒造成損傷。